Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.

Постановка метода ПЦР для определения мРНК гена EGFP

Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Постановка метода ПЦР для определения мРНК гена EGFP

Страница 2

Таблица 9. Оптимальные условия проведения ПЦР.

Выводы

1. Осуществлён синтез конъюгатов олигодезоксинуклеотидов с пиреном. Показано, что используемые условия реакции приводят к получению моно-перинильных конъюгатов с высоким выходом.

2. Проведено сравнение двух методов выделения суммарной РНК из клеток. Показано, что выделение суммарной РНК из клеток с использованием фирменного набора осуществляется проще, быстрее и с большим выходом, однако содержит примеси ДНК и требует стадии обработки ДНКазой. Выделение РНК с использованием экстракции смесью фенол-хлороформ больше времени, затрат турда и имеет меньший выход, однако приводит к получению чистого продукта.

. Для оценки биологического действия антисмысловых олиогуклеотидов выбран метод основанный на ПЦР. Был проведен выбор праймеров к кДНК гена EGFP исходя из оценки термодинамических параметров возможных структур, формируемых ими в растворе и условий взаимодействия с мишенью с последующим тестированием их в условиях эксперимента. Для наиболее эффективной пары праймеров проведена оптимизация условий ПЦР и