Меню сайта

Последние новости

Причина отравления вод океана.

Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.

Секрет выживания лягушек.

Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.

Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.




Постановка метода ПЦР для определения мРНК гена EGFP
Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Постановка метода ПЦР для определения мРНК гена EGFP
Страница 2

Таблица 9. Оптимальные условия проведения ПЦР.

Прямой праймер

EGFP-5

Обратный праймер

EGFP-6

Концентрация праймеров в РС

0,3 мкМ

Концентрация dNTP в РС

50 мкМ

Концентрация Mg2+ в РС

1,5 мМ

Температура отжига

59,5 ºС

Выводы

1. Осуществлён синтез конъюгатов олигодезоксинуклеотидов с пиреном. Показано, что используемые условия реакции приводят к получению моно-перинильных конъюгатов с высоким выходом.

2. Проведено сравнение двух методов выделения суммарной РНК из клеток. Показано, что выделение суммарной РНК из клеток с использованием фирменного набора осуществляется проще, быстрее и с большим выходом, однако содержит примеси ДНК и требует стадии обработки ДНКазой. Выделение РНК с использованием экстракции смесью фенол-хлороформ больше времени, затрат турда и имеет меньший выход, однако приводит к получению чистого продукта.

. Для оценки биологического действия антисмысловых олиогуклеотидов выбран метод основанный на ПЦР. Был проведен выбор праймеров к кДНК гена EGFP исходя из оценки термодинамических параметров возможных структур, формируемых ими в растворе и условий взаимодействия с мишенью с последующим тестированием их в условиях эксперимента. Для наиболее эффективной пары праймеров проведена оптимизация условий ПЦР и

Страницы: 1 2 

Смотрите также

Пространственная дифференциация и направление микроэволюционных процессов в формирующихся периферийных популяциях Cepaea nemoralis
ВВЕДЕНИЕ Для некоторых достаточно хорошо изученных фенетически видов можно выявить центры видового многообразия тех участков ареала, где представлено большинство изученных фенов. В р ...

Почвенные клещи
Введение Клещи представляют огромное собрание мелких арахнид, очень различных по строению и образу жизни и в большинстве сильно изменившихся по сравнению с другими. До недавнего в ...

Концепции современного естествознания
Введение Сведения, подтверждающие современные сведения об эволюции, поступают из разных источников, среди которых главное место занимают палеонтология, биогеография, систематика, сел ...