Меню сайта

Последние новости

Причина отравления вод океана.

Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.

Секрет выживания лягушек.

Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.

Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.




Получение биспиренилного производного олигонуклеотида
Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Получение биспиренилного производного олигонуклеотида

Конъюгаты получали согласно модифицированной методике [30]

Активация.

Реакционная смесь содержала 1 - 4 о.е. (5 - 20 нмоль) цитавлоновой соли олигодезоксирибонуклеотда и по 10 мг высушенных DMAP, PPh3 и (PyS)2. Активацию 5’-концевого фосфата проводили следующим образом: сначала 4 раза повторяли термостатирование при 50 ºС в течение 1 - 1,5 мин и последующее интенсивное перемешивание в течение 5 - 10 с, затем инкубировали при 37 ºС в течение 15 мин.

Конъюгация.

К раствору олигонуклеотида с активированным 5’-концевым фосфатом добавляли пиренилметиламин (2 мг), высушенный в эксикаторе над P2O5 под вакуумом. Реакционная смесь непрерывно перемешивали в течение 2 часов при 56 ºС.

Выделение продукта.

Продукты осаждали из раствора 1,2 мл диэтилового эфира, растворяли в 50 мкл 3 М водного раствора перхлората лития, переосаждали 1,2 мл смеси диэтилового эфира и 2% раствора перхлората лития в ацетоне (1:1) и растворяли в 50 мкл воды. Смесь продуктов реакции разделяли с помощью обращено-фазовой хроматографии в градиенте ацетонитрила (см. 2.4). Фракции анализировали методом задержки в геле с помощью электрофореза в ПААГ в денатурирующих условиях.

Смотрите также

Биофильтрация как способ питания беспозвоночных
Введение В нашем индустриальном обществе проблема загрязнения окружающей среды и переработки промышленных отходов заставляет нас искать и пересматривать методы очистки и переработки в ...

Генная инженерия
Введение Генная инженерия - это область биотехнологий, включающая в себя действия по перестройке генотипов. Суть генной инженерии сводится к пониманию того, что любой организм, будь т ...

Органическая живая природа в концепции современного естествознания
Введение Жизнь на Земле чрезвычайно многообразна. Она представлена ядерными и до ядерными одно- и многоклеточными существами. Богатейший мир многоклеточных существ представлен тремя ц ...