Меню сайта

Последние новости

Причина отравления вод океана.

Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.

Секрет выживания лягушек.

Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.

Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.




Методики проведения экспериментальных работ
Материалы по биологии и химии / Исследование изменений метаболизма эритроцитов донорской крови после взятия ее из организма / Методики проведения экспериментальных работ
Страница 1

· Получение временного хода концентрации глюкозы для каждой пробы, приготовленной по описанию в § 3.3 «Используемые материалы», включало в себя получение 10-12 экспериментальных точек за 3 часа. Перед началом эксперимента концентрацию глюкозы измеряли в капле крови, взятой из пальца того же человека. Это измерение производится гораздо быстрее, чем аналогичное измерение для пробы крови, взятой из вены. Поэтому полученное значение концентрации глюкозы в плазме крови, взятой из пальца, можно считать наиболее близким к in vivo. В сериях экспериментов интервалы между получаемыми точками варьировались в зависимости от поставленной цели. Когда требовалось убедиться в наличии колебаний в пробе крови, вызванных быстрыми осмотическими процессами, происходящими за время, меньшее характерного времени прохождения глюкозы в эритроцит (10 мин) [19], то интервалы устанавливались менее 10 мин. Когда этого не требовалось, то интервалы устанавливались большие.

Так как показания глюкометра иногда были нестабильны и наблюдались выбросы (как в сторону уменьшения, так и в сторону увеличения показаний), то для устранения ошибок для каждой точки проводилось по 2 измерения, а если показания прибора при этом не совпадали в определенных пределах, то проводили и третье измерение. В этом случае при формировании экспериментальной точки, усредняя ее по измеренным величинам, выброс не учитывался. Одно измерение концентрации глюкозы занимало ~40 сек, следовательно, получение одной экспериментальной точки, как правило, ~80 сек, а при наличие выброса ~120 сек.

Средняя ошибка одного измерения концентрации глюкозы определялась на стабилизированной крови посредством пяти измерений концентрации глюкозы в ней, и вычислялась по формуле (5):

,

где - значение концентрации глюкозы в каждом из пяти измерений, - среднее значение концентрации глюкозы по пяти измерениям, n - количество измерений.

· Методика наблюдения временного хода показателя гематокрита в пробах крови. Гематокритная центрифуга позволяет проводить измерение для 12 капилляров. Как правило, одновременно получали экспериментальные точки для 4 проб крови, при этом центрифугировали по 3 капилляра для каждой из проб. Если одновременно экспериментальная точка определялась для двух проб, то центрифугировали по 6 капилляров для каждой пробы крови. Усреднением по измеренным значениям (3-м или 6-ти капиллярам) показателя гематокрита получали экспериментальную точку и оценивали среднюю ошибку измерения по формуле (5).

Одно измерение показателя гематокрита занимало не менее 20 минут, поскольку включало набор крови в капилляры - 8-10 минут, центрифугирование - 5 минут, измерение длины столба осевших эритроцитов и полной длины столба крови в капилляре - 5 минут. Поэтому за 3 часа наблюдений получали 7-8 экспериментальных точек. Таким образом, получали ход величины показателя гематокрита, усредненный по возможным быстрым осмотическим колебаниям объема эритроцитов, если такие были.

· Методика наблюдения временного хода показателя кислотности рН в пробах крови. Одно измерение рН в плазме пробы крови занимало ~ 1 мин. Подготовка рН-метра к измерению рН следующей пробы крови занимало ~ 2 мин. За 3 часа наблюдений для каждой пробы крови было получено 6-8 точек.

· Методика измерения неспецифической проницаемости мембран эритроцитов проб крови для кислорода. С помощью прибора КИНОКС были выполнены отдельные измерения для регистрации факта перехода метаболизма эритроцитов из состояния, близкого к in vivo, в состояние с низкой концентрацией АТФ. В первой и второй серии экспериментов проницаемость мембран эритроцитов не измерялась. По данным этих серий было выяснено, через какое время t после взятия крови из организма параметр (концентрация глюкозы) относительно стабилизируется. В третьей серии первое измерение проницаемости проводилось через это время t для каждой из проб, а второе ее измерение проводилось через 3 часа после начала эксперимента. Характерное время получения кривой оксигенации составляло ~ 8 мин.

Страницы: 1 2

Смотрите также

Демографическая теория Капицы
Введение Сергей Петрович Капица (14 февраля 1928, Кембридж - 14 августа 2012, Москва) - советский и российский учёный-физик, телеведущий, главный редактор журнала "В мире науки&q ...

Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном
Введение   Разработка лекарственных препаратов направленного действия является приоритетной задачей современных молекулярной биологии, биоорганической химии и медицины. В настоящ ...

Биологи разгадали секрет долголетия ночницы Брандта
Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет. Но недавнее исследование показало, что так бывает не всегда. Исключением ...