Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.

Методы выявления генов устойчивости пшеницы

Материалы по биологии и химии / Молекулярно-генетические методы для выявления генов устойчивости пшеницы / Методы выявления генов устойчивости пшеницы

Страница 3

Свойства:

· Полиморфизм AFLP выше, чем RAPD и ISSR.

· Этот метод позволяет определять генетические изменения, вызванные точечными мутациями в сайтах рестрикции или в участках отжига праймеров (присутствие или отсутствие продукта амплификации в спектре) и небольшими вставками и (или) делециями внутри рестрикционного фрагмента (изменение размера полосы в спектре).

· Молекулярно-генетические маркеры легко картируются на хромосомах.

ISSR - Inter Simple Sequence Repeat

При ISSR анализе также как и в RAPD используется один или несколько праймеров длиной 15-24 нуклеотида. Праймеры комплементарны повторяющимся участкам генома, таким как микросателлиты. Микросателлитная ДНК - ДНК из коротких тандемных повторов длиной от 1 до 6 пар оснований. Используются как молекулярные маркеры в определении родства, принадлежности к конкретной популяции, для исследования гибридизации. Микросателлиты характеризуются высокой скоростью изменения последовательностей, обусловленной «проскальзыванием» при репликации ДНК и точечными мутациями.

В данном случае праймеры состоят из тандемных коротких 2-4 нуклеотидных повторов и одного селективного нуклеотида на 3’- конце праймера. Таким образом, продукты ISSR - амплификации содержат на флангах инвертированную микросателлитную последовательность праймера.

Выявляемый полиморфизм с использованием праймеров ISSR более четко воспроизводим, чем в RAPD.

В геномах растений и животных количество микросателлитных повторов очень велико, что делает этот метод удобным для генетического анализа. Микросателлитные последовательности окружают многие гены и могут использоваться как якорные последовательности к этим генам.

Свойства:

· Доминантный тип наследования.

· Относительно высокая точность и улучшенная воспроизводимость по сравнению с RAPD в связи с большей длиной праймера и более ысокой температурой отжига.

· Однако локализация в геноме продуктов амплификации, так же как и функция, остаются неизвестными.

RAPD - Random Amplified Polymorphic DNAанализ включает в себя проведение полимеразной цепной реакции с использованием одного декануклеотидного праймера с произвольной нуклеотидной последовательностью. Продукты RAPD анализа образуется в результате амплификации фрагмента геномной ДНК, фланкированного инвертированной последовательностью данного праймера.

Свойства:

•Высокая чувствительность к изменениям условий реакций.

•Достаточно низкая температура отжига (37С) - (увеличена вероятность образования продуктов амплификации с большим количеством неспаренных оснований).

•RAPD маркеры ведут себя как доминантные и их гетерозиготное состояние не отличается от гомозиготного, поэтому снижается точность оценки при популяционном анализе и при идентификации генетических ресурсов в сравнении с кодоминантными маркерами.

•Низкая воспроизводимость результатов ПЦР.

•Для повышения достоверности необходима большая выборка.

Но все же RAPD анализ может служить своеобразным экспресс - методом выявления генетического полиморфизма, что особенно актуально для малоизученных таксономических групп, а также как источник уникальных локус-специфичных маркеров.

Диагностические возможности RAPD-технологии успешно проиллюстрированы на многочисленных примерах описания генетического разнообразия микроорганизмов, высших растений, беспозвоночных и позвоночных животных.

Заключение

Создание устойчивых к болезням сортов пшеницы и обеспечение длительного сохранения их устойчивости остается актуальной задачей селекции. В связи с этим необходим непрерывный поиск доноров устойчивости взамен утративших эффективность. Требуется проводить дальнейшие анализы, чтобы выявить потенциал всех имеющихся генов, для расширения генетического разнообразия сортов.