Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.

Синтез пиренильных производных олигодезоксинуклеотидов

Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Синтез пиренильных производных олигодезоксинуклеотидов

Синтез проводили по методике, описанной в п. 2.7. Процедуру конъюгации можно разделить на 2 этапа: активация 5’-концевого фосфата (рис. 15, а,б) и присоединение производного пирена (рис 15, в). Механизм реакции можно представить следующей схемой:

Рис. 15. Механизм присоединения пиренил-1-метиламина к 5’-концевому фосфату олигонуклеотида.

Рис. 16. а - хроматограмма монопиренильного производного ODN EGFP-B; б - УФ спектры поглощения продуктов, содержащихся в пиках (1) и (2).

Были получены и охарактеризованы методом задержки в геле и УФ-спектрометрией конъюгаты ODN и пиренил-1-метиламина. Задержка в геле, УФ спектры и спектры флюоресценции свидетельствуют о получении монопиренильных производных.

УФ спектр основного продукта реакции, снятые хроматографом Waters, имеет максимумы в области 260 нм, характерный для олигонуклеотидной части, и 350 нм, характерный для ароматической системы остатка пирена. Спектры конъюгатов различных ODN аналогичны

Анализ продуктов методом электрофореза в ПААГ в денатурирующих условиях показал зелёное флюоресцентное свечение бенда в геле, характерное для пиреновых конъюгатов, и небольшую задержку конъюгатов в геле по сравнению с исходными олигонуклеотидами, что характерно для монопроизводных.