Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.

Проведение полимеразной цепной реакции

Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Проведение полимеразной цепной реакции

Амплификацию производили с использованием кДНК-матрицы и специфической к ней пары праймеров. Готовили реакционную смесь, содержащую dNTP, прямой и обратный праймеры, Taq-полимеразу и ДНК-матрицу в присутствии 1-кратного буфера для ПЦР. Реакционную смесь помещали в термоциклер «Терцик» фирмы «ДНК-Технология» (Россия) с установленной программой изменения температуры: 1 цикл: 94ºС, 3 мин, затем 27 циклов: 94 ºС, 45 с, Тотжига (варьируется в разных экспериментах), 30 с, 72ºС, 30 с, и последний цикл: 72 ºС, 2 мин. Визуализацию проводили методом электрофореза в агарозном геле.

Подбор условий проведения ПЦР с парами праймеров

EGFP

-1,2,

EGFP

-3,2 и

EGFP

-5,6