Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.
Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.
Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.
Образец РНК подвергали гидролизу ДНКазой I для очистки от остатков ДНК в присутствии 1-кратного буфера для ДНКазы I. Реакционную смесь инкубировали при 37 ºС в течение 1 ч. РНК осаждали из реакционной смеси избытком этанола в присутствии ацетата натрия. Осадок растворяли воде. Измеряли оптическую плотность очищенной РНК.
Готовили водный раствор смеси РНК и «гексапраймера» и инкубировали его в течение 3 мин при 70 ºС, затем 1,5 мин во льду. После этого к смеси добавляли остальные компоненты (буфер для ОТ, dNTP, DTT, ревертаза MuMLV). Концентрации компонентов в РС приведены в табл. 4.
Таблица 4. Состав РС для ОТ.
|
Компонент |
Концентрация или количество в РС |
|
Буфер для ОТ |
1 х |
|
dNTP |
1 мМ |
|
DTT |
5 мМ |
|
«Гексапраймер» |
25 мкМ |
|
MuML-V |
40 е.а. |
|
РНК |
2 мкг |
РС инкубировали 10 минут при комнатной температуре, затем 1 час при 42 ºС, затем, для гидролиза остатков РНК, 10 минут при 70 ºС. Качество полученной кДНК оценивали методом ПЦР с использованием специфических пар праймеров.
Смотрите также
Эпителиальные ткани
Эпителиальные ткани
Они покрывают поверхность и полости тела, полости внутренних органов, а
также образуют большинство желез. Соответственно, различают покровный и
железистый эпителии ...