Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.

Выделение суммарной РНК с помощью набора «Gen Elute™ Mammalian Total RNA Kit» фирмы «Sigma»

Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Выделение суммарной РНК с помощью набора «Gen Elute™ Mammalian Total RNA Kit» фирмы «Sigma»

Выделение РНК проводили согласно методике, прилагаемой разработчиками к набору.

Суспензию клеток центрифугировали при комнатной температуре с круговой частотой 800 об/мин в течение 3 мин, к осадку клеток добавляли 5 мкл меркаптоэтанола и 245 мкл «Lysis Solution». Суспензию фильтровали в колонке для фильтрования (Filtration Column), к фильтрованному лизату добавляли 250 мкл 70 % водного этанола. Лизат в колонке для фильтрации при центрифугировании при максимальной круговой частоте в течение 15 с, маточный раствор отбрасывается. Осадок промывается 500 мкл растворов для промывки при центрифугировании при максимальной круговой частоте в течение 15 с: сначала Wash Solution 1, затем Wash Solution 2; маточный раствор каждый раз отбрасывается. РНК из колонки элюируется 50 мкл воды. Качество выделенной РНК проверяли отношением оптических плотностей на длинах волн 260 и 280 нм (оптимальное отношение 1,8) и разделением методом электрофореза в агарозном геле. Качество выделенной РНК проверяли отношением оптических плотностей на длинах волн 260 и 280 нм и разделением методом электрофореза в агарозном геле.