Меню сайта

Последние новости

Причина отравления вод океана.

Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.

Секрет выживания лягушек.

Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.

Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.




Приготовление цитавлоновых солей олигонуклеотидов
Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Приготовление цитавлоновых солей олигонуклеотидов

Для получения цитавлоновых солей олигонуклеотида готовили раствор, содержащий 1 - 6,5 о.е. олигодезоксирибонуклеотида в 90 мкл воды. Расчет добавляемого в реакционную смесь 2% водного раствора цитавлона производили с учётом 2,5-кратного избытка цитавлона по отношению к суммарному количеству атомов фосфора в составе 5’-концевого фосфата и фосфодиэфирных связей олигодезоксирибонуклеотида. Раствор цитавлона добавляли порциями, причём после добавления каждой должен выпадать белый осадок, что свидетельствует о протекании реакции.

Добавляли сначала 1/3 рассчитанного объёма раствора цитавлона к раствору олигодезоксинуклеотида, реакционную смесь перемешивали и центрифугировали при комнатной температуре в течение 5 минут с круговой частотой, равной 12500 об/мин.

После этого в реакционную смесь вносили 1/4 рассчитанного объёма раствора цитавлона, повторяли перемешивание и центрифугирование.

Аналогичные действия выполняли и при добавлении 1/6 рассчитанного объёма раствора цитавлона.

После последнего центрифугирования супернатант отбрасывали, а к осадку добавлялои 100 мкл метанола.

Метанол выпаривали на вакуумном испарителе, полученную соль олигонуклеотида высушивали над P2O5 в вакуумированном эксикаторе.

Смотрите также

Численность, распространение, видовой состав и мобильность земноводных Беларуси
ВВЕДЕНИЕ Поскольку единицами биосферы являются биогеоценозы, обладающие способностью трансформировать вещество и энергию в соответствии со своей структурой и динамикой, то именно с б ...

Анатомия сельскохозяйственных животных
...

Маркерная селекция в животноводстве
Введение Основной задачей современного животноводства является получение высокопродуктивных животных, дающих высококачественную продукцию. Большинство показателей продуктивности имее ...