Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.

Выделение клеток

Материалы по биологии и химии / Исследование системы гомеостаза железа и развития окислительного стресса методами математического моделирования / Выделение клеток

Полиморфноядерные лейкоциты (ПМЯЛ) из циркулирующей крови крыс выделяли в градиенте плотности фикол/верографин [29]. Для этого согласно протоколу кровь, обработанная гепарином (из расчета 200 мкл раствора гепарина с NaCl, 5000 ед. на 10 мл крови) и смешанная с физиологическим раствором в отношении 2:1, была наслоена на смесь 6% раствора декстрана Т-500 и 33,9% раствора верографина в отношении 1:2. Спустя 30 мин, после оседания агрегированных эритроцитов, отбирали плазму (верхний слой) богатую лейкоцитами и разделяли её далее на двойном градиенте фикол-верографин: первый градиент (верхний слой) - верографин (10 частей 33,9%-го раствора) - фикол Т-400 (24 части, 9%-го раствора), плотность 1,070 г/мл; второй градиент (нижний слой) - верографин (10 частей 50%-го раствора) - фикол Т-400 (20 частей, 9%-го раствора), плотность 1,119 г/мл. Заполненные пробирки центрифугировали при 800 g в течение 15 мин. После центрифугирования наблюдались три хорошо выраженные клеточные фракции, разделенные друг от друга слоями градиента. Отбор ПМЯЛ осуществляли из средней фракции, находящейся на разделе фаз первого и второго градиентов. ПМЯЛ составили около 92% этой фракции (данные получены с использованием камеры Горяева). Выделенные ПМЯЛ дважды отмывали 10-кратным физиологическим раствором с использованием центрифуги Eppendorf 5415 при 1550 об/мин. О жизнеспособности клеток судили по окраске на стекле трипановым синим, который является индикатором погибших клеток.