Меню сайта

Последние новости

Причина отравления вод океана.

Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.

Секрет выживания лягушек.

Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.

Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.




Выделение суммарной РНК методом хлороформ-фенольной экстракции
Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Выделение суммарной РНК методом хлороформ-фенольной экстракции

Суспензию клеток центрифугировали при 4 ºС с круговой частотой 1000 об/мин в течение 10 мин. Супернатант отбрасывали, к осадку клеток добавляли 500 мкл буфера PBS, полученную суспензию центрифугировали при 4 ºС с круговой частотой 1000 об/мин в течение 10 мин. К осадку добавляли буфер для лизиса из расчета 200 мкл/106 клеток и инкубировали во льду в течение 13 мин. Затем суспензию центрифугировали при 4 ºС с круговой частотой 13000 об/мин в течение 10 мин, осадок отбрасывали. К полученному раствору добавляли десятую часть его объёма раствора ацетата натрия с pH = 4,2. Дважды проводили фенольную экстракцию и один раз - экстракцию смесью фенола и хлороворма в объёмном отношении 1:1, каждый рас отбрасывая органическую фазу. РНК из смеси осаждали тройным объёмным избытком этанола в присутствии 0,3 М ацетата аммония в течение суток при - 20 ºС. Осаждённую РНК растворяли в 50 мкл воды. Качество выделенной РНК проверяли отношением оптических плотностей на длинах волн 260 и 280 нм и разделением методом электрофореза в агарозном геле.

Смотрите также

Русский ученый и нобелевский лауреат И.И. Мечников
Введение Илья Мечников - выдающийся русский ученый, "подаривший" миру иммунитет. Мальчишка, не выпускающий из рук книги по естествознанию, юноша, пытающийся проникнуть в тай ...

Биологические ритмы и их влияние на все живое
Введение Многие поколения ученых стремились понять и постичь человека. За годы изучения жизнедеятельности организмов простейших, растений и животных ими было выявлены множество циклич ...

Эндоэкология. Прикладное значение эндоэкологии
Введение Человек - это неотъемлемая часть природы. Неразрывными нитями мы связаны с окружающим нас миром. Это и воздух, которым мы дышим, это и вода, что мы пьем, это и пища, которую ...