Меню сайта

Последние новости

Причина отравления вод океана.

Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.

Секрет выживания лягушек.

Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.

Секрет долголетия ночницы.

Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.




Выделение суммарной РНК методом хлороформ-фенольной экстракции
Материалы по биологии и химии / Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном / Выделение суммарной РНК методом хлороформ-фенольной экстракции

Суспензию клеток центрифугировали при 4 ºС с круговой частотой 1000 об/мин в течение 10 мин. Супернатант отбрасывали, к осадку клеток добавляли 500 мкл буфера PBS, полученную суспензию центрифугировали при 4 ºС с круговой частотой 1000 об/мин в течение 10 мин. К осадку добавляли буфер для лизиса из расчета 200 мкл/106 клеток и инкубировали во льду в течение 13 мин. Затем суспензию центрифугировали при 4 ºС с круговой частотой 13000 об/мин в течение 10 мин, осадок отбрасывали. К полученному раствору добавляли десятую часть его объёма раствора ацетата натрия с pH = 4,2. Дважды проводили фенольную экстракцию и один раз - экстракцию смесью фенола и хлороворма в объёмном отношении 1:1, каждый рас отбрасывая органическую фазу. РНК из смеси осаждали тройным объёмным избытком этанола в присутствии 0,3 М ацетата аммония в течение суток при - 20 ºС. Осаждённую РНК растворяли в 50 мкл воды. Качество выделенной РНК проверяли отношением оптических плотностей на длинах волн 260 и 280 нм и разделением методом электрофореза в агарозном геле.

Смотрите также

Онтогенез черепно-мозговых нервов человека
ВВЕДЕНИЕ Онтогенез - это индивидуальное развитие организма, в ходе которого происходит преобразование его морфофизиологических, физиолого-биохимических и цитогенетических признаков. ...

Ботаническая характеристика рода бурачниковых
ВВЕДЕНИЕ Семейство БУРАЧНИКОВЫЕ (BORAGINACEAE) Бурачниковые объединяют около 115 родов и до 2500 видов. Они распространены на всех континентах земного шара, но наиболее широко - в тр ...

Физиология питания
...